algimed_belarus +375 17 202-43-02
algimed_russia +7 499 682-61-09
algimed_uz/ +7 771 254-56-75
Заказ и доставка товаров 0
  • На данный момент у Вас ни одной заявки. Пожалуйста, перейдите в каталог, чтобы выбрать товар.

Связаться с нами
Более 12565 позиций в каталоге.   Свыше 11 100 довольных клиентов!
Главная/Новости/От производителей/"FAST" режим нового анализатора жизнеспособности клеток Vi-cell BLU

"FAST" режим нового анализатора жизнеспособности клеток Vi-cell BLU

"FAST" режим нового анализатора жизнеспособности клеток Vi-cell BLU

В приборе Vi-CELL BLU появилась возможность считывания планшетов впервые в семействе анализаторов клеток Vi-CELL. Данная опция дает возможность загружать до 96 образцов или комбинацию образцов и контролей в прибор для продолжительных испытаний.

Однако тестирование такого большого количества образцов приводит к значительному увеличению времени пробега (около 3 часов для полного 96-луночного планшета). Несомненно, появляются вопросы о использовании прибора в течение такого длительного времени или адекватности результатов у клеток, которые нестабильны вне инкубационной среды.

Для решения данной проблемы, Vi-CELL BLU оснащен опциональным режимом работы "FAST", который можно использовать в конфигурации с планшетом или каруселью для сокращения время тестирования. Данный режим сокращает продолжительность цикла промывки, за счет чего экономится, примерно, 30% времени всего тестирования.

Wash Mode Volume Needed Sample Run Time Interval 100 Images, ~2x10^ cells/ml (mm:ss) Full Plate Time 96 Samples 100 Images, ~2x10^ cells/ml (h:mm:ss)
Normal Wash 200 µL  <130 seconds typical analysis time: normal mode 110 seconds Estimated 3:28:00 Typical 2:56:00
Fast Wash  170 µL   <90 seconds typical analysis time:80 seconds Estimated 2;24:00 Typical 2:08:00

Однако, мы не скрываем того, что стоит умеренно пользоваться данным режимом, в завимости от типа образца и поставленных временынх рамок. Необходоимо понимать, что сокращение времени промывки повышает риск загрязения при переходе между образцами. А длительное использование "FAST" режима может привести к накоплению трипанового синего и белка в жидкостных каналах прибора. Поэтому мы рекомендуем проводить регулярную деконтаминацию.

Настройка "FAST" режима

Благодоря интуитивно понятному софту прибора включение "FAST" режима не вызовет никаких трудностей. Его можно выставлять по умолчанию в настройках или же выбрать для каждого отдельного образца.

The option to select either Normal or FAST mode during queue creation

Оценка прогона переноса

Базовый алгоритм оценки переноса частиц состоит в том, чтобы чередовать образец с нулевым образцами буфера (бланками) на планшете либо в каруселе, при этом работать в обычныом режиме или с включенным "FAST" режимом. Пример такого прогона показано ниже.

Sample ID Wash Sample Type Cell Count
Beads–L07–norm.015   Normal Wash  L5 Bead 11903
Blanks–L07–norm.016   Normal Wash Blank 21
Beads–L07–norm.017   Normal Wash L5 Bead 12061
Blanks–L07–norm.018  Normal Wash Blank 5
Beads–L07–norm.019   Normal Wash L5 Bead 11444
Blanks–L07–norm.020   Normal Wash Blank 26
Beads–L07–fast.001   Fast Wash L5 Bead 11717
Blanks–L07–fast.002   Fast Wash Blank 24
Beads–L07–fast.003   Fast Wash L5 Bead 11368
Blanks–L07–fast.004   Fast Wash Blank 28

Стандартные частицы размера L5 (6602794, серия 9012057F) использовались в примере в качестве общего контроля из-за их номинального размера и приблизительной плотности частиц ~ 4 × 10^6 частиц/ мл. Прибор запускался с использованием профиля считывания, настроенного для частиц L5 на основе профиля частиц L10 по умолчанию.

Клетки СНО представляют собой стандартный тип клеток, который используется для определения переноса частиц п

ри тестировании биологических образцов. Абсолютная концентрация составила около 3 × 10^6 клеток / мл, но это не является критическим параметром, поскольку основная цель исследования - это отношение количества клеток между нормальным и нулевыми образцами (бланками). Анализ проводился по стандартному профилю (протоколу) для клеток млекопитающих.

Концентрация частиц не была критической, но использовалась как показатель ожидаемой эффективности. Регестрировалось количество частиц между образцом и холостыми пробами (бланками). Остаточный перенос определялся по количеству частиц, которые появились в холостых пробах. Также провели анализ случайных изображений, чтобы убедиться, что частицы, обнаруженные в бланках, не были инородным частицами.

Как и предпологалось, при тестировании хостых проб, в них были зафиксированы видимые различия в количествах частиц. Это вызывает некоторые проблемы с внутренними вычислениями, поэтому среднее число частиц является наиболее приемлемым параметром для использования.

Результаты

Настройки прибора для анализа
Cell Type BCI L5 Beads Mammalian
Minimum diameter (μm) 2 6
Maximum diameter (μm) 10 30
Images 100 100
Cell sharpness 22 7
Minimum circularity   0.75 0.1
Decluster degree medium medium
Aspiration cycles 3 3
Viable spot brightness (%)  50 55
Viable spot area (%) 1 5
Mixing cycles 3 3
Результаты, приведенные ниже, показывают несколько прогонов при загрузке образцов в карусель и планшеты. Данные представлены в виде парных результатов, отражающих среднее число выборок и среднее значение переноса зафиксированного между образцами.

L5 Частицы

Run Wash Mode L5 Bead Count Carryover Bead Count % Carryover # Sample Pairs
1 Normal Wash 10629 108 1.01% 20
2 Normal Wash 11784 11 0.10% 26
Normal Wash 11414 164 1.44% 60
Normal Wash 11862 236 1.99% 60
Normal Wash 11326 161 1.42% 40
1 Fast Wash 9392 226 2.40% 20
2 Fast Wash 11147 38 0.34% 54

CHO клетки

Run Wash Mode CHO Cell Count Carryover Cell Count % Carryover # Sample Pairs
1 Normal Wash 3939 3 0.07% 38
2 Normal Wash 5546 9 0.16% 48
3 Normal Wash 7986 3 0.04% 26
4 Normal Wash 5310 27 0.51% 24
1 Fast Wash 3952 5 0.13% 38
2 Fast Wash 5281 23 0.44% 36
3 Fast Wash 8595 21 0.24% 24

Выводы

Анализ T-критерия между количествами остаточных частиц в бланках при нормальной и быстрой промывках дает значение p 0,986, что указывает на отсутствие статистически значимого различия между режимами работы, с точки зрения переноса между образцами. Это доказывает, что можно использовать прибор в любом режиме и быть уверенным, что перенос от образца к образцу незначителен. Следует отметить, что степень изменчивости в нулевых образцах может быть чрезвычайно высокой из-за того, что подсчитывается малое количество частиц, но во всех тестовых случаях процент переноса всегда был значительно ниже 1%.


оригинал статьи

Возврат к списку