Система для электропорации Gene Pulser Xcell Bio-Rad
Gene Pulser Xcell является генератором импульсов, который использует конденсаторы для создания экспоненциально спадающих импульсов или импульсов в форме квадратных волн для электропорации клеток. Система способна генерировать импульсы до 3000 В в высоковольтном контуре, и до 500 В в низковольтном контуре. Для генерации импульсов в высоковольтном контуре используются конденсаторы емкостью 10, 15 и 25 мкФ, находящиеся в основном модуле системы Gene Pulser Xcell. Генерация импульсов в низковольтном контуре требует использования конденсаторов, находящихся в модуле СЕ. Экспоненциальный спад (или разряд емкости) и импульсы в форме квадратных волн являются наиболее часто используемыми формами электрических импульсов.
Gene Pulser Xcell является модульной системой, состоящей из основного и двух дополнительных (СЕ и РС) модулей, а также держателя кювет и собственно кюветы со встроенными электродами.
Модуль СЕ рекомендуется использовать с основным модулем Gene PulserXcell для электропорации большинства эукариотических клеток, включая клетки млекопитающих и протопласты растительных клеток. Модуль СЕ должен быть использован только со средой с низким (<1000 Ом) сопротивлением. В случае с экспоненциально спадающими импульсами модуль СЕ позволяет контролировать емкость контура через увеличение временной константы импульса. Для импульсов в форме квадратной волны модуль СЕ содержит высокоемкий конденсатор, необходимый для их проведения в среде с низким сопротивлением. Модуль содержит набор конденсаторов с функциональным диапазоном от 50 до 3275 мкФ, настраиваемым с шагом в 25 мкФ. Для импульсов в форме квадратной волны модуль СЕ содержит высокоемкий (3275 мкФ) конденсатор, необходимый для проведения этого типа импульсов среде с низким сопротивлением.
Модуль РС рекомендуется использовать для электропорации бактерий и грибов с использованием экспоненциального спада, а также в иных приложениях, в которых высоковольтные импульсы прилагаются к образцам малого объема с высоким сопротивлением. Модуль РС позволяет настроить сопротивление от 50 до 1000 Ом с инкрементом в 50 Ом. Этот модуль используется для контроля сопротивления контура посредством включения сопротивления параллельно образцу, что позволяет уменьшить временную константу экспоненциально спадающего импульса. Это является эффективным способом контроля временной константы при использовании среды с высоким сопротивлением, но практически не оказывает эффекта для сред с низким сопротивлением. Модуль РС значительно снижает вероятность образования дуги в результате приложения высокого напряжения. Не рекомендуется использовать модуль РС для импульсов в форме квадратной волны из-за возможного увеличенного угасания амплитуды импульсов.
Оба модуля (РС и СЕ) имеют интегрированные в них провода для подсоединения к основному модулю (см. Раздел 2 для установки), и оба модуля непосредственно контролируются через интерфейс пользователя на лицевой панели основного модуля.
Основные характеристики и преимущества
- Универсальный электропоратор, способный трансфицировать все прокариотические клетки.
- Совместим с любым буфером для электропорации.
- Содержит в себе предустановленные протоколы для большинства популярных типов бактериальных клеток.
- Обладает гибким ручным программированием.
Технические характеристики
|
Кювета |
+ 0, 4 см; 0,2 см; 0,1 см |
|
Форма колебаний |
Экспоненциальная и квадратичная |
|
Время трансфекции |
2 минуты |
|
Одновременное количество трансфекций |
1 |
|
Запоминание программ электропорации в памяти |
144 |
|
Эукариоты/Прокариоты |
Эукариоты и прокариоты (клетки млекопитающих, бактерий, дрожжей, грибов) |
|
Количество клеток |
<4-5*107 бактерии <1*1010дрожжи, грибы <1*106 клетки млекопитающих |
| Концентрация ДНК, плазмиды микроРНК |
5-60 мкг/мл 10-100 нМ (только Bio-Rad) |
|
Емкость, мкФ |
10,25,50 |
|
Сопротивление образца, Ом |
Минимум 20 при 200–2500 В; Минимум 600 при 2500–3000 В |
|
Размеры (Ш х Д х В), см |
31 х 30 х 14; Модуль PC: 31 х 28 х 5 |
|
Вес, кг |
Главный модуль: 6.6; Модуль PC: 1.9 |
