Система MicroPulser используется для электропорации бактерий, дрожжей и прочих микроорганизмов; ее действие основано на воздействии электрическим импульсом высокого напряжения на образец, взвешенный в небольшом объеме среды высокого сопротивления. Система состоит из модуля генератора импульсов, шоковой камеры и кюветы со встроенными электродами. Образец располагается внутри кюветы между электродами. В состав модуля MicroPulser входит конденсатор, заряжаемый на высокое напряжение.После зарядки конденсатора модуль производит разряд его тока на расположенный в кювете образец. В цепи разряда емкости MicroPulser происходит генерация электрического импульса с формой волны затухания по экспоненте. При разряде конденсатора на образец имеет место скачкообразное увеличение напряжения между электродами до пикового значения (напряжение начала разряда,V0);в дальнейшем с течением времени (t) это значение уменьшается следующим образом - Vt=V0[e-(t/τ)], гдеτ= R x C, постоянная времени, подходящее выражение длительности импульса. Сопротивление цепи R выражается в омах, емкость аппарата C-в микрофарадах. В соответствии с Уравнением 1,τ-это период времени, в течение которого происходит уменьшение показателя напряжения до 1/e (~37%) пикового значения. Конструкция внутренней схемы MicroPulser обеспечивает оптимальные условия электропорации E. coli и S. cerevisiae,а также многих других микроорганизмов, оптимальная эффективность трансформации которых достигается при значении постоянной времени около 5 миллисекунд. Данные условия электропорации создаются путем использования конденсатора емкостью 10 микрофарад и подключения резистора сопротивлением 600 Ом параллельно кювете с образцом, а резистора сопротивлением 30 Ом-последовательно относительно кюветы с образцом.
Технические характеристики:
Кювета
+0, 4 см; 0,2 см; 0,1 см
Форма колебаний
Экспоненциальная и квадратичная
Время трансфекции
2 минуты
Одновременное количество трансфекций
1
Эукариоты/Прокариоты
Прокариоты (бактериальные клетки и дрожжи)
Количество клеток
<4-5*107 бактерии
<1*1010 дрожжи, грибы
Концентрация ДНК, плазмиды
микроРНК
5-40 мкг/мл
Напряжение и ток
3000 В пике при нагрузке> 600 Вт; ограничен на максимуме 100 A
Регулировка выходного напряжения и длительности импульса
Регулируемое напряжение в диапазоне 200–3000 В с точностью 10 В; 5 мс по умолчанию или 1–4 мс с точностью до 0,1 мс.
Каталог
Учебный центр
Сервис центр