Рекомбинантный фактор С

Ре­ком­би­нант­ный фак­тор С - аль­тер­на­тив­ный ЛАЛ-те­сту ана­лиз, ко­то­рый про­во­дит­ся без ис­поль­зо­ва­ния аме­бо­ци­тов ме­че­хво­стов. Дан­ный ана­лиз ос­но­ван на ис­поль­зо­ва­нии ре­ком­би­нант­но­го фак­то­ра С - по­лу­чен­но­го син­те­ти­че­ским пу­тем пер­во­го ком­по­нен­та в кас­ка­де фер­мен­та­тив­ных ре­ак­ций, про­ис­те­ка­ю­щих в аме­бо­ци­тах ме­че­хво­стов при вза­и­мо­действии с мо­ле­ку­ла­ми эн­до­ток­си­нов. Под воз­действи­ем эн­до­ток­си­нов об­ра­зу­ет­ся ак­тив­ная часть, ко­то­рая рас­щеп­ля­ет син­те­ти­че­ский суб­страт, ре­зульта­том че­го яв­ля­ет­ся вы­сво­бож­де­ние флю­о­ро­фо­ра. Ре­ак­ция про­во­дит­ся в 96-ти лу­ноч­ном план­ше­те. Из­ме­ре­ние флу­о­рес­цен­ции про­во­дят в на­ча­ле ре­ак­ции и по­сле ин­ку­би­ро­ва­ния в те­че­ние од­но­го ча­са с по­мо­щью мик­ро­план­шет­но­го флу­о­ри­мет­ра, ис­поль­зуя по­ка­за­те­ли воз­буж­де­ния/из­лу­че­ния на дли­не вол­ны 380/440 нм. Чув­стви­тель­ность ме­то­да опре­де­ля­ет­ся диа­па­зо­ном ка­либ­ро­воч­ной кри­вой. Диа­па­зон из­ме­ре­ний со­став­ля­ет от 0,005 до 5 ЕЭ/мл. Ре­ком­би­нант­ный фак­тор С не про­яв­ля­ет чув­стви­тель­но­сти по от­но­ше­нию к β-D-глю­ка­нам, так как яв­ля­ет­ся эн­до­ток­син-спе­ци­фич­ным. Меж­ду­на­род­ные мно­го­цен­тро­вые ис­сле­до­ва­ния по­ка­за­ли, что до­сто­вер­ность опре­де­ле­ния со­дер­жа­ния эн­до­ток­си­нов в во­де и дру­гих об­раз­цах с ис­поль­зо­ва­ни­ем ре­ком­би­нант­но­го фак­то­ра С бы­ла со­по­ста­ви­ма с та­ко­вой при ис­поль­зо­ва­нии ЛАЛ-ре­ак­ти­вов, по­лу­чен­ных из кле­ток кро­ви (аме­бо­ци­тов) ме­че­хво­стов.

С ян­ва­ря 2021 го­да всту­пи­ла в си­лу но­вая ста­тья Ев­ро­пейской Фар­ма­ко­пеи 2.6.32 «Тест на бак­те­ри­аль­ные эн­до­ток­си­ны с ис­поль­зо­ва­ни­ем ре­ком­би­нант­но­го фак­то­ра С». Те­перь дан­ный ме­тод яв­ля­ет­ся офи­ци­аль­ным фар­ма­ко­пей­ным ме­то­дом в Ев­ро­пе. В бу­ду­щем пла­ни­ру­ет­ся его вне­се­ние и в оте­че­ствен­ную ГФ.